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224XP通訊端口，兩個都通訊不上，提示;端口無法打開或正由另一個應用程序使用，怎么上載下載程序？在系統塊里設置嗎？

可能軟件沒有安裝正確吧？確認與其他PLC能通訊成功？若不能，真就是軟件的問題了
否則按樓上建議，將PLC停止。可能程序中有用到485通訊或UCC通訊等占用了PPI通訊口，PLC停止后就釋放了。
USB轉485的轉換器就可以當下載線用，所以一般懷疑下載線的情況較少。

用的是USB-MPI/PPI通訊電纜的話，需要其驅動，可以選擇PC ADAPTER/PPI才可以。